摘要:[目的]研究“醒腦開竅”針?lè)ê汀罢{(diào)補(bǔ)氣血”針?lè)▽?duì)SAMP10行為學(xué)異常改變的影響。[方法]采用自然快速老化腦萎縮及癡呆模型小鼠SAMP10,于實(shí)驗(yàn)前后各進(jìn)行1次穿梭箱實(shí)驗(yàn),并記錄小鼠遭受電擊次數(shù)、電擊時(shí)間及主動(dòng)反應(yīng)時(shí)間。[結(jié)果]實(shí)驗(yàn)前,6月齡P10與R1相比,各行為學(xué)指標(biāo)均有顯著性差異(P<0.01);P10各組之間無(wú)顯著性差異(P> 0.05);實(shí)驗(yàn)后,醒腦組、補(bǔ)氣血組各項(xiàng)指標(biāo)與P10對(duì)照組比較,均有明顯改善(P< 0.05,或P< 0.01),與R1比較,均有顯著性差異(P< 0.01),而兩種針?lè)ㄩg比較,無(wú)顯著差異(P> 0.05)。[結(jié)論]P10較同月齡R1學(xué)習(xí)記憶能力顯著下降,是理想的腦萎縮及癡呆動(dòng)物模型。“醒腦開竅”針?lè)ê汀罢{(diào)補(bǔ)氣血”針?lè)刹糠指纳芐AMP10的學(xué)習(xí)記憶能力。

關(guān)鍵詞:快速老化腦萎縮及癡呆模型小鼠(SAMP10);行為學(xué);“醒腦開竅”針?lè)?“調(diào)補(bǔ)氣血”針?lè)?o:p>

早老性癡呆(AD)是伴隨老化而出現(xiàn)的以進(jìn)行性癡呆為主的大腦變性**,主要臨床表現(xiàn)為記憶力喪失、智力減退和行為人格退化,至今仍缺乏有效的防治措施。本項(xiàng)研究采用的動(dòng)物模型是從日本引進(jìn)的國(guó)際公認(rèn)的自然快速老化模型小鼠SAM

(Senecence Accelerate Mouse),其中SAMP10品系小鼠以學(xué)習(xí)記憶障礙、腦萎縮為特征;SAMR1隨增齡正常勻速老化,通常作為P品系的正常對(duì)照?！靶涯X開竅”針?lè)ㄊ怯忻樉膶＜沂瘜W(xué)敏院士創(chuàng)立的**老年期癡呆的臨床驗(yàn)方,立足于調(diào)神?！罢{(diào)補(bǔ)氣血”針?lè)ㄊ菍?dǎo)師韓景獻(xiàn)教授根據(jù)虛是老年期癡呆的病理基礎(chǔ)而確立的針?lè)?從治病求本入手,補(bǔ)其正虛,祛其邪瘀,立足于補(bǔ)虛。

1材料與方法

1.1動(dòng)物選擇及分組選擇本院繁殖飼養(yǎng)的6月齡SAMP10雄性小白鼠30只,隨機(jī)分為醒腦開竅針刺組、調(diào)補(bǔ)氣血針刺組、捉抓空白組,每組10只;另外選擇6月齡SAMP1正常老化雄性小白鼠10只,作為正常老化對(duì)照組。

1.2穴位選擇及針刺方法參照中國(guó)針灸學(xué)會(huì)實(shí)驗(yàn)針灸研究會(huì)制定的“動(dòng)物針灸穴位圖譜”,醒腦組選取人中穴、雙側(cè)內(nèi)關(guān)穴,人中穴行雀啄瀉法強(qiáng)刺激10次,內(nèi)關(guān)穴用捻轉(zhuǎn)瀉法20 s;補(bǔ)氣血組選取膻中、中脘、氣海及雙側(cè)血海,均行捻轉(zhuǎn)補(bǔ)法各10 s。上述針?lè)ň涣翎?其他各組則進(jìn)行與針刺組相同程度的捉抓,每次持續(xù)40 s。

1.3實(shí)驗(yàn)內(nèi)容穿梭箱實(shí)驗(yàn):采用上海欣軟信息科技有限公司研制的XR-XC105型小鼠穿梭實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)。在安靜環(huán)境中,每天8∶ 00—12∶00進(jìn)行,室溫(25±1)℃。測(cè)試前先將小鼠置于測(cè)試箱中自由活動(dòng)5 min,以消除其探究反射。程序設(shè)置為:蜂鳴5 s,繼之電刺激15 s,間隔15 s,而后重復(fù)上述程序,如此循環(huán)20次。電腦將自動(dòng)記錄非條件反射次數(shù)(即電擊次數(shù))、遭受電擊時(shí)間及主動(dòng)反應(yīng)時(shí)間等參數(shù),

以評(píng)價(jià)小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。

1.4實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)前,各組小鼠依次做穿梭箱實(shí)驗(yàn),所得結(jié)果為實(shí)驗(yàn)前數(shù)據(jù)。然后醒腦組及補(bǔ)氣血組開始針刺, SAMP10及R1對(duì)照組則進(jìn)行與針刺組(醒腦組和補(bǔ)氣血組)相同程度的捉抓, 1次/ d,共持續(xù)2周。2周后再進(jìn)行1次穿梭箱實(shí)驗(yàn),所得結(jié)果即為實(shí)驗(yàn)后數(shù)據(jù)。全部實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均應(yīng)用方差分析和t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理(應(yīng)用SPSS 8.0統(tǒng)計(jì)軟件)。

2實(shí)驗(yàn)結(jié)果

本實(shí)驗(yàn)觀察到與正常老化的SAMP1及SAMP10針刺組相比,SAMP10對(duì)照組表現(xiàn)為明顯的行動(dòng)遲緩,活動(dòng)量減少,對(duì)周圍環(huán)境的改變和刺激反應(yīng)遲鈍,皮毛無(wú)光澤,脫毛,部分小鼠出現(xiàn)皮膚潰瘍及脊柱彎曲等。各組小鼠穿梭箱實(shí)驗(yàn)電擊次數(shù)、電擊時(shí)間及主動(dòng)反應(yīng)時(shí)間明顯不同。數(shù)據(jù)結(jié)果詳見表1。

以上結(jié)果提示: 1)實(shí)驗(yàn)前, 6月齡SAMP10與同月齡正常老化的SAMP1相比,各項(xiàng)指標(biāo)均有顯著性差異(P< 0.01),說(shuō)明P10學(xué)習(xí)記憶能力低于正常對(duì)照組R1;而6月齡P10各組之間各項(xiàng)行為學(xué)指標(biāo)無(wú)明顯差異(P> 0.05),說(shuō)明處于同一水平。2)實(shí)驗(yàn)后,醒腦組、補(bǔ)氣血組各行為學(xué)指標(biāo)與同品系對(duì)照組比較,均有明顯改善(P<0.05,或P<0.01),但未達(dá)到正常老化的R1水平,說(shuō)明兩種針?lè)刹糠指纳芐AMP10學(xué)習(xí)記憶能力下降的狀況,而兩種針?lè)ㄩg比較,無(wú)顯著差異(P> 0.05)。3)實(shí)驗(yàn)前后,

各組自身進(jìn)行對(duì)照比較,均未出現(xiàn)顯著性差異(P10對(duì)照組電擊時(shí)間、電擊次數(shù)有增高趨勢(shì),主動(dòng)反應(yīng)時(shí)間有減少趨勢(shì)。針刺組則與之相反)。

3討論

行為學(xué)實(shí)驗(yàn)是專門研究動(dòng)物行為變化的常用實(shí)驗(yàn)方法,通常用于觀察和研究神經(jīng)、精神及心理等方面的異常變化或表現(xiàn),在基礎(chǔ)研究中具有十分重要的意義,也是判斷癡呆的基本方法之一。穿梭箱實(shí)驗(yàn)是定量測(cè)試動(dòng)物行為學(xué)改變的重要手段。SAMP10在全身迅速老化的同時(shí),腦老化所致的腦機(jī)能衰退表現(xiàn)尤為明顯,表現(xiàn)為學(xué)習(xí)記憶困難,低恐怖不安狀態(tài)等智能障礙。本課題觀察了“醒腦開竅”針?lè)ê汀罢{(diào)補(bǔ)氣血”針?lè)▽?duì)SAMP10行為學(xué)異常改變的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,實(shí)驗(yàn)后,6月齡SAMP10針刺組的電擊次數(shù)、電擊時(shí)間均明顯少于同品系的P10對(duì)照組(P< 0.05,P< 0.01),而主動(dòng)反應(yīng)時(shí)間則明顯長(zhǎng)于同品系P10對(duì)照組(P< 0.05);醒腦組與補(bǔ)氣血組之間,則無(wú)顯著性差異。說(shuō)明上述兩種針?lè)ň懿煌潭鹊母纳?o:p>

SAMP10小鼠的學(xué)習(xí)、記憶能力。從P10針刺組實(shí)驗(yàn)前后自身對(duì)照來(lái)看,各項(xiàng)指標(biāo)未出現(xiàn)明顯變化,且P10針刺組與R1相比,實(shí)驗(yàn)后各項(xiàng)指標(biāo)仍存在顯著性差異,說(shuō)明針刺只能部分改善SAMP10小鼠學(xué)習(xí)、記憶能力。